Серология
Содержание:
- Особенности проведения серологического анализа крови
- Показания к проведению серологических анализов
- Серологическое исследование крови в районе Москворечье — Братеево
- Сущность методов, их преимущества и недостатки
- Реакция преципитации (РП)
- Антитела IgG
- Особенности транспортировки и хранения биологического материла
- Расшифровка
- Какие инфекции помогает выявить серологическое исследование.
- Подготовка к исследованию
- Методы проведения серологического исследования
- Что делать при обнаружении венерических болезней
- Методы серологических исследований
- Особенности исследований
Особенности проведения серологического анализа крови
Серологический анализ крови проводится для того, чтобы узнать, болеет ли человек определенными инфекционными заболеваниями или он абсолютно здоров. Серологическое исследование делают в лаборатории, после выдается расшифровка. Изучение позволяет выяснить, насколько далеко зашла болезнь, определить стадию заболевания. Определение процедуры и подробное описание этапов анализа освещает википедия.
Анализ крови на антитела показан при большом количестве заболеваний. Речь идет о редких и широко распространенных недугах. Известно, что антитела и антигены способны взаимодействовать. Именно эту особенность врачи и используют, проводя исследование.
Если человек болеет, происходит образование иммунных защитных комплексов. Врач, проводя исследование, добавляет антиген или антитело, а потом наблюдает за реакцией. Именно так становится понятно, какая инфекция присутствует в организме. После этого можно смело начинать лечение.
Серологический анализ крови выполняется следующим образом. Врач берет антиген возбудителя заболевания, добавляет его в сыворотку. В результате манипуляций начинается химическая реакция. Врач производит оценку и выдает результат.
Часто возникает ситуация, при которой события развиваются противоположным образом. Речь идет о том, чтобы определить, какое заболевание у человека. Сделать это можно по имеющимся антигенам. Чтобы их выявить, врач берет антитела и добавляет их в кровь.
Если необходимо узнать, какая группа крови у человека, также сдают материал
Врачи обращают пристальное внимание на то, какова свертываемость крови. Возможно, при исследовании будет выявлено отклонение от нормы, тогда, если не начать лечение, последствия могут быть плачевными. Речь идет не только о тромбозе, у человека возможен инфаркт
Кроме того, повышается вероятность инсульта
Речь идет не только о тромбозе, у человека возможен инфаркт. Кроме того, повышается вероятность инсульта.
Как подготовиться к анализу?
Если вы желаете пройти исследование, то помните о том, что это надо сделать натощак. Анализ крови берут в лабораториях. То, как протекает реакция, врач определяет, используя сыворотку крови. Именно по ней можно понять, как взаимодействуют антигены и антитела. Полученная информация позволяет представить полную картину. Врач, опираясь на результат исследования, назначит наиболее эффективное лечение. Поэтому, если есть возможность, обязательно сдайте материал.
Соблюдайте диету хотя бы в день, предшествующий дню сдачи материала. Не ешьте жирного, сладкое также стоит исключить. Не съедайте слишком много пищи за раз. Алкоголь полностью исключите. Кроме того, не стоит изнурять себя физическими нагрузками. Поскольку стресс может стать причиной искажения результатов, избегайте его перед тем, как сдавать анализ крови.
Какие заболевания определяет анализ?
Если вы думаете, что у вас лямблии, амебиаз, то смело обращайтесь в лабораторию. Исследование материала покажет, если человек болен токсоплазмозом, описторхозом и рядом других заболеваний. Антитела станут сигналом к тому, что стоит начать лечение.
Данное обследование назначают для беременных, при подозрении на сердечно-сосудистую патологию. Варикозное расширение вен, аутоиммунные заболевания — все это показания для проведения исследования.
Кроме того, исследование делают:
- после лечения;
- до и после операции;
- для оценки эффективности лечения.
В урологии и венерологии исследование делают чаще всего.
Что называют нормой?
Если по результатам видно, что антител нет, то это очень хорошо. Инфекция отсутствует. Но такое случается редко, особенно если раньше были все симптомы, указывающие на наличие заболевания. Как правило, серологический анализ часто становится последним подтверждением диагноза.
Обычно анализ крови на антитела делают два раза. Сначала просто определяют, есть ли инфекция. Второй раз анализ на антитела сдают для того, чтобы понять, насколько динамично идет процесс. Если количество связей между антителами и антигенами увеличилось, то идет заражение. Для того чтобы правильно выбрать лечение, врач должен получить больше информации. В такой ситуации проводятся дополнительные химические реакции. Так можно понять, с какой болезнью придется бороться. Кроме того, так определяется стадия болезни.
Результат исследования крови на антитела может быть только повышенным. Нормой является значение на отметке «ноль». Именно по этой причине результат не может быть пониженным.
Показания к проведению серологических анализов
- Подозрение на заражение венерическими инфекциями – выделения из половых путей, резь и дискомфорт при мочеиспускании, вытекание из уретры гноя и слизи, появление мутной мочи с неприятным гнилостным запахом. Поводом для анализа должно стать увеличение лимфоузлов, появление язв и высыпаний на различных областях тела.
- Исключение заражения инфекциями при имевшемся контакте с больным. Исследование позволяет выявить инфицирование даже при отсутствии симптомов болезни.
- Признаки заражения вирусами гепатита B,C, дельта, Е. Обследоваться надо при возникновении симптомов поражения печени – боли и тяжести под рёбрами с правой стороны живота, пожелтения кожи и склер глаз, кожном зуде, сыпи в виде мелких кровоизлияний (петехий), ухудшении свертываемости крови, потемнении мочи, осветлении кала.
- Признаки молочницы (кандидоза) – инфекции, вызванной размножением дрожжеподобных грибков кандида (candida). Сдать анализ нужно при появлении белого налёта, напоминающего творог, на наружных половых органах, в паховых складках, вокруг заднего прохода, под молочными железами, во рту. При выраженном кандидозе рекомендуется также провериться на СПИД, поскольку очень часто такое состояние связано со значительным угнетением иммунитета.
- Подозрение на заражение туберкулезом – положительная проба Манту, которая делается в предплечье. В норме размер покраснения на месте введения вещества-туберкулина не должен превышать 5 мм. Анализ крови на серологическую реакцию также нужно сдать при долго не проходящем кашле, одышке, увеличенных лимфоузлах, кровохарканье, боли в костях и суставах, признаках туберкулеза, обнаруженных на УЗИ почек, малого таза и при проведении других исследований.
- Возможное заражение ВИЧ, при котором угнетается иммунитет, что проявляется частыми тяжело протекающими простудными инфекциями, ухудшением общего самочувствия, увеличением лимфоузлов, высыпаниями на теле, слабостью, проблемами с пищеварением, похудением. Поскольку заражения ВИЧ и туберкулезом часто сочетаются, в этом случае желательно обследоваться сразу на оба заболевания.
- Планируемая беременность – будущей маме нужно сдать серологический анализ на TORCH инфекции – токсоплазмоз (заражение паразитом токсоплазмой), краснуху, инфицирование цитомегаловирусом и вирусом герпеса. Эти инфекции очень опасны для будущего ребенка, поскольку приводят к развитию тяжелых врождённых патологий. Обоим родителям нужно обследоваться на венерические болезни и гепатит. Серологические исследования также проводятся в период беременности.
- Прохождение медицинских комиссий для трудоустройства, получения водительского удостоверения, вида на жительство, гражданства, поступления в учебные заведения, постановки на учет в военкомате, выдачи формы 070/у для санаторно-курортного лечения. В этих случаях проводится исследование на СПИД, сифилис, гепатит.
- Планируемое стационарное лечение. В этом случае серологические исследования нужно пройти непосредственно перед госпитализацией, поскольку срок действия анализов ограничен 1-2 месяцами.
- Различные виды донорства – крови и ее компонентов, половых клеток, костного мозга, тканей. Доноры обязательно сдают серологический анализ на сифилис, ВИЧ и гепатит.
- Контроль проводимого лечения. По изменениям в результатах врач определяет, стихает ли инфекция и не переходит ли заболевание в хроническую форму.
Планируемая беременность
Признаки молочницы
Врач смотрит снимок
Серологическое исследование крови в районе Москворечье — Братеево
Иммунологический или серологический метод диагностики представляет собой исследование крови, основой которого является изучение взаимодействия друг с другом антител и антигенов в организме человека. Во время проникновения в организм чужеродных объектов (вирусов, бактерий, грибов, аллергенов и прочих) иммунная система начинает активно бороться и защищаться, что сопровождается выработкой антител.В нашем медцентре в районе метро Борисоводля уточнения диагноза можно сдать развернутый анализ крови — иммунологическое исследование. Данный серологический анализ определит группу крови человека, аутоиммунные заболевания, наличие в организме опухолевых клеток, беременность.
Показания для проведения серодиагностики
Проведение серологического исследования крови целесообразно в таких ситуациях:
- пациент страдает частыми вирусными заболеваниями;
- инфекционный воспалительный процесс протекает длительно и плохо поддается лечению;
- появление высыпаний на коже аллергического характера;
- подозрение на аутоиммунные заболевания;
- гормональные сбои в организме;
- непереносимость некоторых лекарственных препаратов;
- сахарный диабет.
Иммунологический анализ крови проводится в обязательном порядке пациентам, которых готовят к операции или диагностическому хирургическому вмешательству.
Подготовка к серологическому анализу крови
Для того чтобы показатели исследования были верными, очень важно правильно подготовиться к исследованию. Кровь сдают строго натощак из вены
За 8-10 часов до проведения забора биологического материала пациенту запрещается есть, курить, принимать какие-либо лекарственные препараты и употреблять алкоголь. Кроме этого, рекомендуется за несколько дней до серодиагностики исключить стрессы и снизить физические нагрузки, в противном случае результаты анализа могут быть не информативными.
Методы выполнения серологических реакций
Методов проведения серологических анализов великое множество — какие-то из них наиболее информативные, иные имеют ряд недостатков и требуют больших затрат лаборатории. В нашем медицинском центре пациенту могут предложить следующие высокоточные методы серодиагностики:
- Метод Кунса (РИФ, реакция иммунофлюоресценции) — исследование проводится прямым и непрямым способами. Образцы биологического материала окрашивают специальной сывороткой с антителами, после этого бактерии начинают подсвечиваться зеленым светом в ультрафиолетовых лучах. Результаты исследования оцениваются по 4х бальной шкале (1 плюс — свечение бактерии еле выраженное, почти незаметное, 2 плюса — по периферии бактерии наблюдается слабое свечение, 3-4 плюса — бактерия ярко светится зеленым по периферии).
- РНГА (реакция непрямой гемагглютинации) — данный метод серологической диагностики используется для выявления инфекций, вызванных бактериями или простейшими. Результаты оцениваются по интенсивности осадка красных кровяных телец: 1 плюс — слабой интенсивности, 2 — средней, 3-выраженной интенсивности, 4 плюса — резко интенсивная реакция. Положительным результатом считают показатели 3 или 4 плюса;
- ИФА (иммуноферментный анализ) — наиболее точный и высокочувствительный метод серодиагностики. При помощи этого способа можно не только выявить возбудителя инфекции, но и отслеживать динамику развития заболевания по росту уровня антител. При помощи ИФА выявляют заболевания, передающиеся половым путем, в том числе и инфекции с латентным течением, ТОРЧ-инфекции, вирусные гепатиты.
Обратившись в наш медцентр, Вы можете быть уверены в полной конфиденциальности информации — результаты анализов с расшифровкой врач отдаст пациенту лично в руки!
Сущность методов, их преимущества и недостатки
Существует несколько серологических методов диагностики, но принцип их применения сводится к одному – к реакции “антиген-антитело”. Это основывается на том, что антиген инфекционного возбудителя, если он есть в крови обследуемого, обязательно даст специфическую реакцию на соответствующее антитело в контрольной (диагностической) сыворотке крови. И наоборот, антитело, если оно есть в крови обследуемого, даст реакцию на контрольный антиген, содержащийся в диагностикуме лаборанта.
Серологические анализы имеют существенные достоинства в диагностике многих заболеваний, а именно:
- доступность и охват исследованиями широких масс населения,
- относительная простота методик,
- умеренная стоимость большинства исследований,
- быстрота выполнения анализа (три-пять рабочих дней).
Тем не менее, у серологических исследований имеются и некоторые недостатки, например, необходимость инвазивного вмешательства при заборе крови, а что существеннее – в некоторых случаях невозможность отличить уже перенесенную инфекцию от текущей болезни.
Итак, из серологических исследований крови выделяют следующие методики:
- Реакция агглютинации (РА), чаще используется реакция не прямой, или пассивной агглютинации (РПГА). Основывается на поиске антигена (в данном случае, агглютиногена) в биологической жидкости пациента, или на поиске антител (агглютининов) в исследуемой сыворотке крови. Может применяться не только в диагностике инфекционных заболеваний, но и в определении ревматоидного фактора (РФ), а также в определении группы крови.
- Реакция связывания комплемента (РСК).
- Иммуноферментный анализ (ИФА).
- Реакция иммунофлюоресценции (РИФ).
РПГА
РПГА выполняется следующим образом. Исследуется сыворотка крови пациента, в которой осуществляется поиск антигена или антител с помощью антительного или антигенного диагностикума, соответственно. При этом контрольные антитела или контрольные антигены фиксируются на эритроцитах барана или на частичках латекса размером не более 5-ти мкм. В том случае, если в крови выявляются искомые антитела или антигены, с контрольным диагностикумом происходит реакция агглютинации (склеивания), которую можно оценить визуально по наличию хлопьев или комочков в прозрачной среде диагностикума.
РСК
Отличие РСК заключается в следующем. Для поиска антител в исследуемой сыворотке крови к тому или иному антигену используется диагностикум, содержащий не только эритроциты барана, но еще и свободный комплемент. Комплемент- это белковый комплекс, способный активировать мембраноатакующий компонент. Эритроциты же сенсибилизированы собственными к ним антителами, поэтому здесь два пути развития событий. Первый – если антитела, допустим, к возбудителю коклюша у пациента в крови циркулируют, то система комплемента будет направлена на ликвидацию этих только что образовавшихся комплексов “антиген-антитело”, а эритроциты барана останутся нетронутыми. Гемолиза эритроцитов барана не произойдет – диагностикум останется прозрачным, с небольшим осадком на дне из эритроцитов барана. РСК положительная (гемолиза нет).
И второй путь – антител к коклюшу в крови пациента нет, тогда системе комплемента придется связать комплекс “антиген-антитело” на эритроцитах барана. В этом случае будет гемолиз эритроцитов барана, визуально это выглядит, как прозрачная однородная красно-оранжевая лаковая кровь. РСК отрицательная (гемолиз есть).
ИФА
Для проведения ИФА используются те же самые диагностикумы, но меченые ферментами (щелочная фосфатаза, пероксидаза и др). Таким образом, на положительные комплексы “антиген – антитело” формируется реакция, результат которой с легкостью можно визуально оценить на специфических тест-системах. Преимущество ИФА в том, что результат готов уже через несколько дней, и даже часов – это экспресс-диагностика (чаще применяется при экспресс диагностике ВИЧ – инфекции).
РИФ
РИФ отличается от предыдущих методик тем, что в последнем случае антитела к определенным возбудителям помечаются флюоресцентными веществами. При рассмотрении исследуемых образцов ткани пациента, обработанных мечеными антителами, в люминисцентном микроскопе образуемые комплексы “антиген – антитело” светятся, значит, реакция положительная.
Реакция преципитации (РП)
Для того чтобы выявить крайне малые частицы антигенов, используется реакция преципитации. Это может быть белок (или его часть), соединения белков, липидов или углеводов, частично представленные бактерии и их токсины. Сыворотку для проведения анализа при помощи этой реакции получают, заражая лабораторных животных, обычно это кролики. Таким методом пользуются для получения почти любой преципитирующей сыворотки.
Механизм проведения серологической реакции преципитации похож по действию на реакцию агглютинации. Антитела, которые содержатся в сыворотке, смешиваются с антигенами в коллоидном растворе, соединяясь в крупные белковые молекулы. Эти молекулы оседают на дно пробирки или на гелевый субстрат. Этот вариант исследования считается высокоточным, и с его помощью можно обнаружить даже ничтожно малые дозы вещества. Реакция преципитации, также получившая широкое распространение в судебной медицине, позволяет диагностировать чуму, туляремию, сибирскую язву, менингит.
Реакции подобного типа проводят не только в жидкой среде, но используют для этой цели агаровый гель. Называется эта процедура методом диффузной преципитации. Она дает возможность изучить сложносоставные антигенные смеси. В геле антитела и антигены движутся друг к другу с неодинаковой скоростью и при встрече создают линии преципитации, по которым и дается заключение.
Какой еще известен метод серологической реакции?
Антитела IgG
Основная роль антител IgG — это длительная защита организма от большинства бактерий и вирусов — хотя их выработка происходит более медленно, но ответ на антигенный раздражитель сохраняется более устойчивым, чем у антител класса IgM.
Уровни антител IgG повышаются медленнее (через 15-20 дней после начала заболевания), чем IgM, но остаются повышенными дольше, поэтому могут показывать давно текущую инфекцию при отсутствии IgM АТ. IgG могут находиться на низком уровне в течение многих лет, но, при повторном воздействии того же антигена, уровень антител IgG быстро повышается.
Для полной диагностической картины необходимо определить антитела IgA и IgG одновременно. При неясном результате IgA, подтверждение осуществляется определением IgM. В случае положительного результата и для точной диагностики второй анализ, сделанный через 8-14 дней после первого, должен быть проверен параллельно для определения роста концентрации IgG. Результаты анализа должны интерпретироваться в комплексе с информацией, полученной в других диагностических процедурах.
Антитела IgG, в частности, используются для диагностики Helicobacter pylori — одной из причин язвы и гастрита.
Особенности транспортировки и хранения биологического материла
Сразу же после взятия крови её перевозят в специальную лабораторию, где в этот же день осуществляют подготовку сыворотки. Хранить ее можно не более четырех или шести дней в холодильнике при температуре от 2 до 4 градусов. Если требуется сохранить сыворотку более длительный срок, то она замораживается. Для того чтобы не нарушать качество биологического материала, замораживание и размораживание можно производить только однократно. Длительное хранение делает антитела неактивными, и они теряют часть своих свойств. Самыми чувствительными к снижению температуры хранения считаются иммуноглобулины класса М.
После того как сыворотка разморожена, ее хорошо перемешивают, чтобы получить однородный состав. Это помогает восстановить концентрацию антител, которые содержатся в этом материале.
Расшифровка
В расшифровке на первом месте стоит приставка Anti, после которой следуют буквы T или G, что указывает на антитела или антигены. Ранние и поздние тела возбудителя болезни указываются как M и G соответсвенно. Например, анализ на гепатит на ранние антитела выглядет как Аnti-НАV IgМ, поздние Аnti-НАV IgG. Цифры со знаками + указывают на количество обнаруженых тел. Например, Аnti-НАV IgМ +11 и Аnti-НАV IgG +++ 1000 означает, что человек переболел гепатитом ранее, на данный момент воспалительного процесса в организме нет. HВsAg антиген, показывающий наличие заболевания. Аnti-НВе – признак вялотекущей формы гепатита.
По группам крови иная расшифровка – А, В и 0. 0 (+) – первая положительная группа крови, 0 (-) первая отрицательная. А0 и АА втораяя группа, ВВ и В0 третья, АВ четвертая. Знак + положительный резус, – отрицательный. При исследовании крови матери и эмбриона, результаты матери пишут первыми, через дробную черту плода. Если обнаружен резус конфликт, то в конце ставят три восклицательных знака.
Какие инфекции помогает выявить серологическое исследование.
Серологическая диагностика позволяет выявить возбудителя
СИ позволяют выявить определённое заболевание при наличии на него подозрения, то есть в основе анализа лежит знание того, какой именно элемент необходимо искать.
Если у пациента присутствует определённая симптоматика либо иные исследования указывают на заболевание, назначается серологический анализ.
Серологические исследования используют для диагностики следующих инфекций:
- вирус гепатита А, В, С, D, Е;
- сифилис;
- ВИЧ;
- герпес;
- цитомегаловирус;
- краснуха;
- корь;
- паротит;
- Эпштейн-Барр;
- хеликобактер;
- хламидии;
- микоплазмы;
- токсоплазмы;
- лямблии;
- гельминты;
- уреаплазмы;
- парвовирус;
- вирус ветряной оспы;
- вирус клещевого энцефалита;
- вирус Денге;
- коклюш;
- боррелии;
- легионеллы.
Серологические исследования способны выявить любые инфекции в лабораторных условиях, если в наличии есть Аг возбудителя инфекции.
Подготовка к исследованию
Чаще биологическим материалом служит кровь, реже слюна, кал, моча, срезы тканей, альвеолярные смывы, спинномозговая, амниотическая жидкости. Серологические исследования включают в себя множество методов выявления возбудителей, от этого зависят определенные правила подготовки. Общие рекомендации перед серологическими тестами:
- последний прием пищи за 9-12 часов;
- за 24 часа ограничить употребление жирной, жареной, соленой, острой пищи, алкогольных напитков;
- в день сдачи крови нельзя есть, разрешено пить обычную негазированную воду;
- по возможности не курить за 10 часов до сдачи;
- прекратить прием любых лекарственных препаратов, в том числе витаминов. Если медикаменты назначены на постоянной основе и прекратить прием нельзя, предупредить врача;
- за 24 часа избегать стресса, исключить физические нагрузки.
Желательно, чтобы перед сдачей человек находился в спокойном состоянии, так как при любых эмоциональных проявлениях в кровь выделяются гормональные вещества, белки (кортизол, адреналин, норадреналин и др.). Если назначены инструментальные методы диагностики, то в первую очередь сдают кровь, чтобы последующие обследования не повлияли на результат анализа.
Методы проведения серологического исследования
При попадании в организм чужеродных антигенов начинается активная выработка к ним антител. Антигены и антитела взаимодействуют с протеканием различных процессов — агглютинация, преципитация. Именно эти процессы и регистрируются при серологическом исследовании крови.
Реакции “антиген-антитело” регистрируют с помощью химических и физических методов. Их достаточно много, но часть из них уже устарела, и практически не применяется.
- Реакция агглютинации, РА. Проба уже практически нигде не применяется.
- Реакция непрямой гемагглютинации, РНГА. Сложный метод, определяет вирусные и бактериальные инфекции.
- Реакция латекс-агглютинации, РЛА. Используется как экспресс-метод диагностики вирусных и бактериальных инфекций.
- Реакция преципитации в агаре. Используют для оценки степени токсичности бактерий, чаще всего при дифтерии.
- Иммуноэлектрофорез — разделение антигенов на гелевой основе. Используется при диагностике ВИЧ-инфекции.
- Реакция связывания комплемента, РСК. Сложный двухэтапный метод.
- Реакция нейтрализации, РН. Определяет наличие вирусных антител, тип ботулотоксина.
Чувствительность этих методик составляет 70-80%. Их применение постепенно сокращается благодаря появлению новых, более эффективных способов. Следующие два метода относятся к иммуносерологии. Здесь используются химические или физические метки, которые обозначают комплексы “антиген-антитело”.
Иммунофлюоресцентный метод
Иммунофлюоресцентный метод исследования основан на способности микробиологических объектов светиться под ультрафиолетовой лампой. Проба применяется как метод экспресс-диагностики. Сыворотку сначала окрашивают специальным флюоресцентным красителем, а затем помещают ее под микроскоп. Если в ней есть комплексы антиген-антитело, они будут светиться.
Иммуноферментный анализ
Иммуноферментный анализ, ИФА, выявляет антитела в сыворотке или антигены в любой биологической жидкости, полученной от больного. Метод наиболее распространенный, обладает высокой чувствительностью и специфичностью. Позволяет диагностировать любые инфекции.
Что делать при обнаружении венерических болезней
Если серологическая диагностика подтвердила наличие ИППП, то необходимо незамедлительно переходить к этапу лечения, чтобы избежать осложнений и хронизации процесса. Пациенту следует повторно записаться на консультацию к лечащему врачу. Он назначит этиотропное комплексное лечение и будет динамически наблюдать за состоянием пациента во время медикаментозной терапии.
Тайтл: Серологические исследования: что это такое, анализ крови на определение инфекций, как сдавать и расшифровать, методики реакций для определения заболеваний
Дескрипшен: Что такое серологические исследований и для выявления каких заболеваний они используются. Как проходит анализ крови на определение инфекция. Как подготовиться, сдавать и расшифровать результат после получения. Методики проведения реакций для определения заболевания.
Методы серологических исследований
Способов проведения диагностики множество, как и заболеваний, которые они выявляют. Наиболее значимые:
- Агглютинация.
- Преципитация
- Гемагглютинация.
- Торможение гемагглютинации.
- Непрямая реакция Кумбса.
- Коагглютинация.
- Преципитация.
- Двойная радиальная иммунодиффузия.
- Реакция связывания комплемента (РСК).
- Иммунофлюоресценция (РИФ).
- Иммуноферментный метод (ИФА).
- Нейтрализация.
Чаще всего в лабораториях применяют ИФА, РИФ, РСК, реакции агглютинации.
Иммунофлюоресцентный метод (РИФ)
Для проведения исследования необходим биологический материал пациента, люминесцирующая жидкость. Второй компонент содержит антитела к предполагаемому возбудителю заболевания, которые помечены флуоресцеинизотиоционатом.
Виды РИФ:
- Прямой – материал пациента смешивают с мечеными антителами, если это срез ткани, обрабатывают его поверхность. Если возбудитель присутствует, образуется светящийся комплекс.
- Непрямой – проводят в 2 этапа. На первом в сыворотку или другой материал добавляют немеченые (первые) антитела. На втором вводят меченые (вторые) антитела против первых.
Полученные комплексы исследуют под люминесцентным, оптическим микроскопом ручным способом или автоматическим с помощью микрочипового цитометра. Из-за флуоресцентного вещества комплексы при затемнении излучают зеленое свечение, яркость которого отмечают плюсами от 1 до 4. Чем меньше плюсов, тем меньше комплексов с возбудителем заболевания.
Иммуноферментный метод
Как и РИФ, основан на маркировке чужеродного материала или белковых иммунных компонентов. В качестве маркировочного вещества выступают различные ферменты, которые имеют высокую специфичность, умеренную каталитическую активность, стабильность при образовании комплексов. Методы ИФА: гомогенные, гетерогенные. При первых все реакции происходят в жидком растворе. При вторых реакции проводят при участии твердого носителя.
Суть ИФА заключается в образовании комплексов иммунных белков человека с чужеродными антигенами сначала в жидком растворе, затем на твердой фазе. Под ней подразумевают прикрепление антигенов, антител к стенкам лунок полистиролового микропланшета. То есть после смешивания материала пациента с антителами против возбудителя смесь переносят на поверхность с лунками, куда прикрепляются антитела, антигены. Дальше изучают состав материала.
Реакция связывания комплимента
Для исследования необходимы: кровь или другой материал пациента, сыворотка с антителами, комплимент. Сначала смешивают кровь с сывороткой – образуется комплекс. После добавляют комплимент, который связывается с комплексом. Если связи между антиген-антитело не образуется, то комплемент остается в свободном, несвязанном состоянии. Чтобы определить его состояние в исследуемой жидкости, добавляют гемолитическую смесь (эритроциты барана с гемолитической сывороткой). Если комплемент свободен, он соединяется с гемолитической смесью – реакция отрицательная, возбудитель не обнаружен.
Реакции, связанные с агглютинацией
Самые простые серологические реакции – с применением антибактериальной сыворотки. Исследуемую кровь пациента смешивают при комнатной температуре с различными сыворотками определенной концентрации. Результат оценивают по концентрации сыворотки, при которой произошла агглютинация. С помощью агглютинации определяют группу крови, резус-факторы.
Важно!
Распространенным методом серологической диагностики являются реакции, основанные на феномене преципитации: иммуноэлектрофорез, иммунодиффузия и др.
Особенности исследований
При исследовании на бруцеллез проводится контроль сыворотки крови на самозадержку без антигена. Это позволяет повысить достоверность теста. Результат анализа на бруцеллез может быть положительным, отрицательным или невыраженным, то есть вызывающим сомнения. При получении сомнительных результатов, рекомендуется повторный забор крови. Также бруцеллез диагностируется по результатам посева крови, исследования костного мозга и спинно-мозговой жидкости.
Достоинства и недостатки серологии
Диагностика с применением серологических методов широко используется в современной медицине. Особенно актуален этот тест при выявлении вирусных и инфекционных заболеваний. Этот же тип анализов используется при географических скринингах и медицинских обследованиях для предотвращения эпидемиологических вспышек.
Серологические анализы имеют ряд преимуществ.
- Серологический тест любого типа имеет высокую достоверность.
- Анализы на серологию проводятся достаточно быстро. Результат РСК известен уже через сутки, а получить его можно посредством интернета, не выходя из дома. В особых случаях при стационарном лечении тест проводится в течение нескольких часов.
- РСК позволяет контролировать развитие болезни, и отслеживать эффективность проводимого лечения.
- Серологические методы исследования отличаются невысокой стоимостью и доступны пациентам.
Серологические анализы имеют и некоторые недостатки. Для того, чтобы обследование дало максимально достоверную информацию анализ крови следует проводить с учетом времени инкубационного периода болезни.
На достоверность исследования может повлиять человеческий фактор. Если пациент пренебрегает правилами подготовки к исследованию или лаборант допустил ошибку в обработке образца крови, возможно получение ложного или сомнительного результата. Такая ситуация возникает приблизительно в 5% случаев. Как правило, лечащий врач на основании клинических показаний легко вычисляет ошибку РСК.
Серологическое исследование крови современный и надежный способ выявления таких опасных заболеваний как ВИЧ, гепатит, бруцеллез, ЗППП и пр. Этот раздел медицины направлен на изучение плазмы крови человека и ее иммунологических свойств. Серологический метод широко распространен, а стоимость исследований в частных лабораториях сравнительно невысока. Для проведения анализа используется современное оборудование, которое сводит к минимуму влияние человеческого фактора на результаты исследований.