Лабораторный анализ: виды, проведение, цели. медицинская лаборатория

Введение

Клиническая
лабораторная диагностика
является одним из важнейших этапов
обследования больного. Лабораторные
исследования назначаются для уточнения
диагноза, проведения дифференциальной
диагностики заболеваний, обоснования
тактики лечения и оценки эффективности
проводимой терапии. Вместе с тем, на
результаты анализов зачастую влияет
не только состояние пациента, но и
технические ошибки, которые могут быть
допущены при сборе биологического
материала и транспортировке его в
лабораторию. Поэтому современному
врачу-клиницисту необходимо не только
уметь оценить результаты лабораторных
исследований, но и знать технические
особенности проведения тех или иных
анализов, а также особенности подготовки
больных к данным процедурам.

В учебном пособии
приведено описание наиболее распространенных
в клинической практике лабораторных
методов диагностики, в том числе
клинического и биохимического анализов
крови, исследований системы гемостаза,
общего анализа мочи, функциональных
проб почек и др. Изложены технические
подходы, показания и противопоказания
к применению этих диагностических
методов, принципы оценки отклонений от
нормальных показателей и интерпретации
полученных результатов.

Учебное пособие
предназначено для студентов 2 и 3 курсов
лечебного, педиатрического и
стоматологического факультетов.

Расшифровка результатов

Для правильной постановки диагноза серологические реакции должны расшифровываться квалифицированным специалистом. Выявление антител еще не говорит о наличии заболевания, в некоторых случаях циркуляция иммуноглобулинов в крови — это норма. Так, в нашем организме постоянно присутствуют антитела IgM от кори, ветряной оспы и т.д. Они являются маркером перенесенной инфекции и защищают нас от повторного инфицирования. Поэтому учет результатов анализа крови и расшифровка серологического исследования должны проводиться индивидуально для каждого пациента.

Однако существуют определенные серологические маркеры инфекционных заболеваний:

• Выявление в крови иммуноглобулинов класса A к вирусу или бактерии свидетельствует об остром инфекционном процессе, длящемся не более 14-ти дней.
• Если в крови найдены иммуноглобулины класса M, то требуется расширенная лабораторная диагностика, потому что эти антитела – маркер как уже перенесенной болезни, так и длительного инфицирования.
• Нарастание титра антител в 4 и более раз в двух последовательно взятых анализах крови говорит о наличии инфекционного заболевания.
• Выявление любых антигенов патогена свидетельствует о том, что возбудитель присутствует в организме.

В случае неясной диагностической картины проводятся повторные серологические тесты или обследование дополняется другими методами исследования (ПЦР, бакпосев и т.д.)

Полный анализ качества воды

Основа в осуществлении анализов – полная качественная оценка качества воды из скважины, пробы из природного источника, осадков атмосферы, а также вод из стоков. Сегодня многие компании предоставляют квалифицированные услуги по определению физических и химических показателей качества и пригодности для употребления воды.

Благодаря анализу воды можно определить, пригодна ли она для употребления или нет

Обычно проводится проверка вод:

1. Для питья центрального и нецентрального трубопровода снабжения водой. Эта жидкость, нужная для употребления людьми внутрь, в бытовых целях, для применения в процессе перерабатывания продовольствия и производства пищи. Регламент — СанПиН 2.1.4.1074-01.
2. Из природных источников (поверхностная, подземная), осадки атмосферы. Задача охраны вод на поверхности от загрязнения актуальны для России, особенно для регионов вдоль реки Волги. Исследования поверхностных вод в лаборатории выполняются с целью выявления качества жидкости для питья и бытовых нужд, контроля за загрязнением производством, стоками в быту, а также для выявления качества объектов рыбно-хозяйственного назначения.
3. Вода сточная.

При сбрасывании сточных вод в канализационную сеть необходимо проводить проверку результативности очищения и соответствия стоков прописанным в законе нормам. Проверка должна проводиться регулярно, сроки также указаны в законодательных документах.

Что такое серологический анализ

Серологические реакции являются важным инструментом для выявления причины инфекционного заболевания. Серодиагностика — специфический анализ крови, который основан на взаимодействии антигенов и антител в сыворотке.

Антитела представляют собой белковые молекулы, образующиеся в организме человека через несколько дней после контакта с патогеном. Они являются строго специфичными для каждой инфекции и вырабатываются для уничтожения возбудителя. Распознавание этих белковых фракций позволяет быстро выявить и микроорганизм, к которому они образовались. Антигены же представляют собой чужеродные белки, содержащиеся в бактериях. Синтезированное антитело находит в крови антиген и прочно связывается с ним, не позволяя ему губительно влиять на организм.

Реакция связывания этих двух белков с образованием единого комплекса лежит в основе применения всех серологических реакций. Для поиска антител используются особые стандартные растворы с антигенами возбудителей (диагностикумы), которые добавляют к исследуемой крови. Серодиагностика определяет все белковые маркеры инфекций, а последующая расшифровка результатов дает информацию еще и о продолжительности заболевания. Эта особенность характерна только для серологического анализа, что делает его методом выбора во многих клинических ситуациях.

Клиническая лабораторная диагностика

Основной задачей данного вида диагностики является выявление или подтверждение наличия патологии, которую невозможно однозначно подтвердить или опровергнуть органолептическими методами исследования. Для этого могут быть использованы разнообразные вспомогательные методы. Условно их можно разделить на следующие группы:

• Методы, усиливающие воспринимающие возможности человека, к ним относится, например, оптическая микроскопия.
• Методы, использующие характерные биохимические особенности исследуемого организма, к данной группе относятся все серологические методы диагностики.
• Методы, использующие характерные особенности патологического агента, к ним относятся биологические и культуральные методы исследования.

В зависимости от цели исследования производится та или иная совокупность методов, позволяющая добиться максимально полного и точного ответа на поставленный вопрос. За постановку и правильный результат каждого анализа отвечает врач клинической лабораторной диагностики.

Биохимический анализ крови

Процедура венепункции и забора крови для биохимического анализа

Основная статья: Биохимический анализ крови

Биохими́ческий ана́лиз кро́ви — лабораторный метод диагностики, применяемый в клинической практике для определения функционального состояния систем и тканей организма человека. Биохимический анализ помогает выявить нарушение функции печени, почек, расстройство белкового, липидного и углеводного обмена, диагностировать наличие активного воспалительного процесса, в том числе ревматического, а также различные расстройства водно-электролитного обмена и степень дисбаланса микроэлементов. Таким образом, проведение биохимического анализа крови позволяет не только выявить патологию, но и определить степень остроты воспалительного процесса, назначить или скорректировать лечение.

Клинический анализ крови

Основная статья: Клинический анализ крови

Клини́ческий ана́лиз кро́ви — врачебный лабораторный анализ, позволяющий оценить не только содержание гемоглобина и скорость оседания эритроцитов (СОЭ), но и количество эритроцитов, цветовой показатель, количество лейкоцитов и лейкоцитарную формулу (лейкограмму), тромбоцитов. Данный анализ позволяет выявить наличие анемии, а также воспалительного процесса и новообразования форменных элементов крови.

Анализ крови молекулярно-биологическими методами (полимеразная цепная реакция, ПЦР, PCR)

Анализ крови методом ПЦР (Полимеразная цепная реакция) — метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе). Позволяет выявить ДНК, РНК патогенных микроорганизмов, мутации в соматических клетках человека и животных, растений, микроорганизмов и активно используется в инфектологии, генетике человека, репродуктологии, установлении родства и др.

Иммуноферментный анализ крови

Иммуноферментный анализ (сокращённо ИФА, англ. enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) — лабораторный иммунологический метод качественного или количественного определения различных низкомолекулярных соединений, макромолекул, вирусов и пр., в основе которого лежит специфическая реакция антиген-антитело.

Диагностика лейшманиоза

Диагноз устанавливается на основании:

• имеющегося очага болезни;
• специфических клинических проявлений;
• данных лабораторной диагностики.

В биохимическом анализе – повышение гамма-глобулинов.

В большинстве случаев проводится:

• паразитологический анализ пунктатов костного мозга для обнаружения в нем лейшманий;
• исследование толстой капли и мазка крови – являются дополнительными методами, так как в них микроорганизмы определяются не так часто;
• посев крови на среду NNN;
• серологическая диагностика. Используется метод определения флюоресцирующих антител (ИФА-РНИФ), реакция связывания комплемента (РСК), реакция латекс-агглютинации с белком, выделенным из обнаруженных лейшманий (РЛА), проводятся биологические пробы с использованием лабораторных животных.

Для диагностики висцерального лейшманиоза делают посев крови. Реже применяется биопсия лимфатических узлов, ткани печени и селезенки.

Диагностика кожных вариантов лейшманиоза дополняется исследованием содержимого язв. Забираются соскобы и биоптаты кожи, позволяющие обнаружить возбудителя.

Выздоровевшим больным проводят профилактические пробы (реакция Монтенегро с лейшманином).

Лечение лейшманиоза

Основу лечения лейшманиозов составляют препараты 5-и валентной сурьмы (сольсурмин, натрия стибоглюконат), мономицин, акрихин, аминохолон, липосомальный амфотерицин В, пентамидин, милтефозин.

Из немедикаментозных средств при лечении применяются:

• Криотерапия.
• Теплотерапия.
• Хирургическое лечение.

Лечение висцерального лейшманиоза

Для лечения висцерального лейшманиоза используют препараты 5-и валентной сурьмы (сольсурмин, натрия стибоглюконат). При применении этих препаратов летальность снижается на 75 — 90% по сравнению с нелеченными случаями заболевания. На основании исследований, проведенных в Африке, выявлено, что в 30% случаев эти препараты оказывались неэффективными, а у 15% отмечались рецидивы. К препаратам 2-го ряда относятся пентамидин и липосомальный амфотерицин В. Из хирургических методов лечения в ряде случаев показана спленэктомия.

Лечение кожного лейшманиоза

При появлении бугорков показано местное лечение в виде мазей и лосьонов, содержащих мономицин, мепакрин, сульфат берберина, уротропин. При развитии язв внутримышечно вводят мономицин. Язвенную поверхность обрабатывают аминохинолином. Показано лазерное облучение язвы. Препараты амфотерицина, пентамидина и пентавалентной сурьмы применяются только в тяжелых случаях и при рецидивах заболевания.

Лечение кожно-слизистого лейшманиоза

Эффективные препараты для лечения данной формы заболевания отсутствуют. Болезнь трудно поддается лечению и часто рецидивирует. Применяются препараты пятивалентной сурьмы, амфотерицин В и новарсенол.

Рис. 9. На фото кожная форма лейшманиоза. Язва на конечности и лице.

Забор и транспортировка

Для проведения исследования требуется правильно подготовить воду. Ее забор делается по схеме:

1. Берется только стерильная бутылка.
2. Водопроводный кран, откуда будет делаться забор воды, предварительно обжигается.
3. Из крана на протяжении 7-10 минут должна сливаться вода. Только после этого ее можно набирать в стерильную емкость.
4. Тара наполовину набирается водой, закрывается пробкой и перевозится в лабораторию. При этом вода при доставке к месту анализа не должна контактировать со стерильной пробкой.

Для исследования подходит только та вода, с момента забора которой прошло не больше 1,5 часа.

Сам анализ проводится по следующему плану:

1. Осуществляют подготовку лабораторной посуды и всех материалов. Вся посуда стерилизуется, промывается и тщательно сушится. Стерилизация происходит в сушильном шкафу. Температура внутри него должна быть порядка 160-165С. Посуда обрабатывается сухим жаром на протяжении часа. Вместо сушильного шкафа может применяться автоклав. В нем температура ниже – порядка 126С. Обработка длится полчаса.
2. Простерилизованную посуду вынимают из шкафа только после того, когда он остынет до температурных значений меньше 60С.
3. Обработанную посуду помещают в лабораторные шкафы. Они должны плотно закрываться.
4. Готовят стерильную воду. Сначала исследуемая вода разливается по флаконам, которые закрываются пробками. После этого флаконы с водой стерилизуются в автоклаве в течение 20 минут при температуре 120С. Такая вода пригодна для использования в течение 2 недель.
5. Готовят питательную среду. Ее компонентами может быть как мясной бульон, так и глюкоза, лактоза или фильтрованная желчь скота.
6. Готовят химические реактивы для конкретного анализа.
7. Подготовленную питательную среду ставят на водяную баню, после чего охлаждают до 45-50С.
8. Расставляют стерильные чаши с пометками.
9. Берут несколько проб питательной среды и делают два посева в стерильные чаши.
10. Колбы со взятой для анализа воды открывают, обжигают их горлышки и немного продувают их воздухом через пипетку. Она должна быть стерильной.
11. Чистой палочкой делается забор воды. Она добавляется в стерильные чаши, которые закрываются пробкой.
12. Взятая вода заливается остуженным питательным раствором. Чаша со смесью быстро перемешивается вращательными движениями. Далее чаша ставится на ровную поверхность. Смесь внутри нее должна застыть.
13. Чаша с застывшим раствором переворачивается вверх дном и ставится в термостат. Там создается оптимальная среда для выращивания посевов (37С). Чаша находится в термостате сутки.
14. Чаша с выращенными колониями микроорганизмов кладется на затемненный фон вверх дном. При помощи лупы делается подсчет количества появившихся колоний бактерий. При подсчетах учитывается число микроорганизмов на 1 см3 взятой для анализа воды.
15. Результаты фиксируются в протоколе и регистрационном журнале. Дополнительно фиксируются особые условия, при которых проходил анализ.

Какие виды лабораторных исследований существуют?

Клиническая лаборатория может проводить такие анализы:

Если в клинической лаборатории применяют метод иммунологии, то в основном такие исследования основываются на взаимодействии антигенов. Эти методы помогают диагностировать наличие паразитов в организме человека, различить инфекционные болезни, выявить гормональные нарушения, а также определить склонность к аллергии и патологии. С помощью этого анализа можно еще установить группу крови.

Анализ крови по-другому можно еще называть гематологическим исследованием. Проводят анализ для того, чтобы можно было определить многие болезни, при которых структура клеток меняется

Такие анализы могут выявлять серьезные проблемы, например, лейкемию, миелому, воспалительный процесс во внутренних органах.

Не менее важной считается молекулярная биология. Это лабораторное исследование основывается на полимеразной цепной реакции, при которой исследуются клетки ДНК

С помощью этой диагностики есть возможность выявить гепатит и ВИЧ-инфекции.

Цитологический — позволяет внимательно изучить отдельные клетки, которые рассматриваются только под микроскопом. После этого предоставляются результаты анализов, расшифровка которых может указывать на наличие раковых клеток в организме, диагностируются аутоиммунные болезни, а также определяются воспалительные патологические процессы, которые могут развиваться у пациента.

Отдельным видом клинических анализов можно назвать паразитологию. С помощью специального лабораторного исследования удается распознать наличие в организме клещей и гельминтов. Чаще всего специалистами используются методы Дарлинга, а также нативного мазка.

Токсикологические исследования проводятся для того, чтобы можно было выявить наличие в организме чужеродных тел и веществ, например таких, как яды и токсины.

Биохимические анализы проводятся намного чаще, чем другие, перечисленные выше. С помощью этих исследований определяется уровень белка в сыворотке, нормы глюкозы в моче и крови.

Методы социологического исследования

Социологические исследования основываются на теоретических и эмпирических методах, дополненных спецификацией тематики. Рассмотрим, каким образом они преобразуются в социологии.

• Анализ различных источников для получения максимально точной информации. Здесь изучаются и книги, и рукописи, и видео, и аудио, и статистические данные. Один из видов этого метода – это контент-анализ, который трансформирует качественные факторы изучаемых источников в их количественные характеристики.
• Социологическое наблюдение. С помощью этого метода собираются социологические данные путём непосредственного изучения явления в его нормальных, естественных условиях. В зависимости от цели наблюдения оно может быть контролируемым или неконтролируемым, лабораторным или полевым, включенным или невключенным.
• Анкетирование, которое в данной сфере превращается в социологический опрос. Респондентам предлагается заполнить анкету, на основе которой в дальнейшем исследователь получает массив социальной информации.
• Интервью, то есть устный социологический опрос. В ходе прямой беседы между исследователем и респондентом устанавливаются личные психологические отношения, которые способствуют не только получению ответов на поставленные вопросы, но и изучению эмоциональной реакции респондентов на них.
• Социальный эксперимент – исследование того или иного социального процесса в искусственных условиях. Он проводится для проверки выдвинутой гипотезы и испытания способов управления сопутствующими процессами.

Тенденции развития клинической лабораторной диагностики

Внедрение компьютерных технологий. Внедрение таких технологий, формирование архива изображений и документации на основе цифровой кодировки позволяют осуществлять разработку стандартных программ для формирования электронных сетей. К ним относятся госпитальные, лабораторные, а также универсальные системы архивирования и передачи данных о пациентах (теле- консультаций и конференций, экспертных систем, телеинтраоперационной диагностики и прочих).

Расширение возможностей новых методов исследований. В данном случае алгоритмы обследования больных выстраиваются на основе использования минимально возможного количества наиболее информативных для конкретного случая исследований.

Сокращение сложных исследований. В рамках данного мероприятия проводится отказ от методик, которые требуют нагрузочных проб, обременительных для персонала и больных, чреватых риском возникновения побочных эффектов или осложнений.

Ускорение цикла лабораторного обследования. Данное мероприятие является актуальным для отделений экспресс-диагностики и предполагает применение методологии комплексного обследования на основе интегрированных систем клинического лабораторного анализа.

Централизация исследований. Данное мероприятие связано с постепенным внедрением высокопроизводительных модульных систем, в том числе при иммунохимических, биохимических, гематологических исследованиях, проведение которых осуществляется на поточных многокомпонентных линиях. В таком случае происходит существенное сокращение затрат в расчете на 1 анализ, повышение аналитических характеристик лабораторных методов и подготовка условий для реальной диспансеризации населения.

Специализация. Данное мероприятие позволяет сосредоточить производственный и интеллектуальный потенциал для максимально углубленного проведения клинического исследования по специализированным видам лабораторной диагностики. Также становится возможным применение подтверждающих тестов для выделенных групп, которые обследовались после скрининговых процедур.

Стандартизация. В рамках данного мероприятия осуществляется формирование технологии преемственности на основе применения стандартизованного оборудования, заключений, методов и т. д. В таком случае клинико-диагностическая лаборатория не проводит исследования, не соответствующие стандарту.

3. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это метод ферментативного получения ампликонов (большого количества копий) исследуемых фрагментов ДНК путем повторных циклов репликации и денатурации (разделения цепи ДНК на отдельные нити); при этом происходит копирование только исследуемого участка ДНК (при условии его присутствия в данном образце), поскольку только этот участок соответствует заданным условиям.

Метод ПЦР идеально подходит для обнаружения микроорганизмов, трудно визуализирующихся, медленно растущих или сложных в культивировании. ПЦР является наиболее предпочтительным методом для диагностики заболевания в острый период. Основным лимитирующим фактором при использовании ПЦР является содержание в исследуемой пробе достаточного количества материала (нуклеиновой кислоты возбудителя). Для многих возбудителей известно, что их количество в крови меняется с течением времени; таким образом, в какой-то момент времени ПЦР может показать ложноотрицательный результат у инфицированного пациента

Таким образом, для врача крайне важно знать тропность возбудителя к тканям организма и отправлять на исследование тот материал, в котором вероятность обнаружения возбудителя наиболее высока (например, мочу – при диагностике лептоспироза, плаценту или пунктат семенников при подозрении на бруцеллез, синовиальную жидкость  — при исследовании на боррелиоз)

К техническим недостаткам этого метода можно отнести возможность ложноотрицательных результатов из-за присутствия ингибиторов реакции в пробе, а также возможность ложноположительных результатов вследствие контаминации. Кроме того, данный метод не всегда подходит для оценки эффективности лечения, поскольку ПЦР выявляет как живые микроорганизмы, так и их «останки».

Виды лабораторных исследований, которые выполняются в «МедикСити»:

• бактериологические исследования;
• биохимические анализы;
• гемостазиологические исследования;
• гистологические исследования;
• серологические исследования;
• иммунология, иммунный статус;
• иммуноферментный анализ;
• общеклинические исследования;
• ПЦР, ДНК-диагностика;
• цитологические исследования;
• микробиологические исследования;
• базовые комплексы;
• программы обследований.

Многие виды обследований мы включили в специальные абонементы и программы, что делает наши услуги максимально удобными и экономичными для пациентов.

Комплексные программы лабораторных исследований

• Аллергологическое обследование
• Диагностика заболеваний желудка
• Диагностика заболеваний печени
• Диагностика заболеваний почек
• Диагностика рисков развития онкологических заболеваний
• Диагностика углеводного обмена (сахарный диабет, метаболический синдром)
• Диагностика урогенитальных инфекций
• Диагностика функции щитовидной железы
• Оценка гормонального статуса
• Планирование беременности
• Предоперационное обследование
• Пренатальный скрининг
• Риск развития атеросклероза
• Система гемостаза (скрининг)

Мы гарантируем:

• достоверность результатов анализов;
• оперативность исследований;
• информативность исследований;
• конфиденциальность информации;
• широкий спектр выполняемых исследований.

Современные методы бактериологического исследования

Все бактериологические исследования можно разделить на две группы в зависимости от того, каков предполагаемый результат.

I. Исследуемый объект должен быть стерилен.

В такой ситуации обнаружение любого микроорганизма является поводом для серьезного беспокойства. О чем идет речь? О крови, моче, материнском молоке, спинномозговой жидкости. Принципиально другой вопрос состоит в том, что взять для бактериологического исследования мочу или молоко и не нарушить при этом стерильности — очень сложно и практически невозможно в амбулаторных условиях. Неудивительно, что к положительным результатам, когда в моче или молоке обнаруживается некая бактерия, врачи часто относятся с определенной (весьма значительной) долей скепсиса. Никогда не бывает стопроцентной уверенности в том, что этот микроб действительно живет в молоке, а не попал туда с поверхности кожи, действительно живет в моче, а не на слизистой оболочке мочеиспускательного канала.

II. Для исследования берется заведомо нестерильный материал.

Всегда, когда изучается нечто, находящееся в контакте с окружающей средой, это нечто содержит бактерии. Любые мазки со слизистых оболочек, любые современные исследования слизи, мокроты, кала в обязательном порядке заканчиваются тем, что будет найдено определенное количество самых разнообразных микробов. Обнаруженные микробы по-разному взаимодействуют с человеческим организмом. Это позволяет выделить три группы бактерий:

1.

Бактерии нормальные, мирные, безвредные или даже полезные, являющиеся естественными обитателями исследуемой среды;

2.

Бактерии опасные, с большой долей вероятности способные вызвать болезнь — патогенные. Их обнаружение — тревожный сигнал, повод к углубленному обследованию, лечению;

3.

Бактерии условно-патогенные — бактерии, мирно сосуществующие с организмом человека, но потенциально опасные, способные вызвать болезнь при определенных обстоятельствах, которые в большинстве случаев возникают тогда, когда ослабевает иммунная защита организма ребенка.

Алгоритм бактериологического исследования

Узнать имя микроба — это далеко не все, хотя и очень важно. Ведь обнаружить некую бактерию — например, в мазке из носа золотистый стафилококк — вовсе не значит доказать, что именно он является причиной насморка: вполне возможно, что стафилококк живет себе мирно в носоглотке, а насморк вирусный или аллергический

Как же разобраться?

Во-первых, понимать, что любые бактериологические исследования — это дополнительная диагностика, а основная диагностика — это реальные жалобы и симптомы.

Во-вторых, следует знать, что современные культуральные методы бактериологической диагностики позволяют не только обнаружить микроб, но и определить, какое количество бактерий присутствует во взятом для исследования материале. В результате мы получим из лаборатории бланк бактериологического исследования, в котором увидим не только имя бактерии, но и ее концентрацию. Выглядит это примерно так: «Обнаружен S. aureus 106», что означает: обнаружен золотистый стафилококк в концентрации 106 микробных клеток на миллилитр (м.к./мл).

Выявив рост бактерий, можно ответить на вопрос, к каким антибактериальным средствам (антибиотикам) они (бактерии) чувствительны. Для этого в питательную среду добавляют различные современные препараты и оценивают, прекращается ли размножение микробов. Прекращается — значит, бактерия чувствительна к данному антибиотику, не прекращается — устойчива.