Анализ на скрытые инфекции: список, какие сдают

Разновидности ПЦР-анализов

Вариаций такой ПЦР диагностики существует много. Выбор определенного метода зависит от многих факторов: предположительного диагноза, возможностей доступных лабораторий, метода взятия материала и пр.

Наиболее часто используются такие разновидности ПЦР:

• вложенная;
• ступенчатая;
• с горячим стартом;
• виртуальная;
• ассиметричная;
• в реальном времени и т. д.

Преимущественно используют ПЦР в реальном времени, так как способ характеризуется самыми точными результатами и максимальной скоростью обработки данных. После его применения заключение готово через час-два.

Если врач выдает направление на обследование с применением полимеразной цепной реакции, то он должен уточнить, какой именно биоматериал необходимо предоставить пациенту и каким образом подготовиться к отбору пробы.

Анализ крови

Кровь в качестве биоматериала для тестирования берут при подозрении на ВИЧ, вирусный гепатит, токсоплазмы, половой герпес и цитомегалию. Для большинства этих патогенов до использования этого метода диагностика базировалась на выявлении антител к возбудителю, что сильно затягивало время обнаружения микробов в тот период, когда антитела еще не вырабатываются.

Перед сдачей крови для диагностики в данном случае не нужны особые приготовления, но лучше, если проба будет отобрана натощак. Единственное обстоятельство, способное серьезно исказить результаты — прием антибиотиков, поэтому сдаче должен предшествовать временной отрезок после приема подобных лекарств в несколько дней или недель в зависимости от типа антибиотика.

В самых современных клиниках в последнее время для отбора крови на ПЦР используют вакуумные системы, которые минимально повреждают кожные покровы и сводят к минимуму вероятность попадания в пробу загрязняющих агентов из воздуха, инструментов или рук лаборантов.

Анализ мазка

Используется как в гинекологии, так и в венерологии для определения заболеваний, передающихся половым путем. Часто назначают ПЦР мазка во время беременности для выявления скрытых факторов, способных негативно повлиять на формирование плода или ход беременности.

Подготовка к отбору материала заключается в том, чтобы полностью исключить половые контакты за несколько суток до процедуры. Проводить спринцевания марганцовкой или настоями трав тоже нельзя. На протяжении критических дней и 2-х дней после них мазок на ПЦР-анализ не берется.

Отбор биоматериала производят в лаборатории из влагалища, шейки матки, цервикального канала или уретры.

ПЦР-анализ мазка позволяет выявить патоген, который устойчив к определенному виду антибиотиков. Кроме того, показаниями к такому виду диагностического обследования выступают:

• осложненная беременность без видимых причин;
• острое течение венерической болезни;
• предположительное хроническое течение венерического заболевания;
• выявление причин бесплодия или самопроизвольных абортов.

Анализ кала

Анализ кала с применением полимеразной цепной реакции назначается специалистом для уточнения наличия инфекции. Подготовка к отбору пробы кала для ПЦР заключается в следующем:

• исключить за несколько суток слабительные средства в виде любых свечей, масел или оральных медикаментов;
• не употреблять накануне лекарства или продукты, которые придают калу выраженную окраску.

Материал для ПЦР-определения лучше всего доставить в специальном контейнере для кала с палочкой. Внутреннее пространство контейнера стерильно, поэтому протирать или промывать его не следует

Во время отбора образца важно отслеживать, чтобы не задеть внутреннюю поверхность приемника, также в пробе не должно быть следов мочи. Перед отбором запрещено применение клизм

Анализ мочи

Такое исследование с помощью ПЦР позволяет извлечь ДНК образец вируса или бактерии. Забор мочи лучше проводить утром натощак. Лучше всего, если это будет происходить непосредственно в лаборатории.

Обязательные условия подготовки для получения результатов исследования мочи в лаборатории полимеразной цепной реакции:

• выдержать 3 недели после приема антибиотиков;
• перед отбором жидкости не пить и не есть;
• запрет вагинального секса за сутки до сдачи пробы;
• в контейнер нужно поместить первую порцию материала после пробуждения.

Кому нужно обследоваться на ПЦР?

ПЦР на половые инфекции делают в первую очередь тем, кто имеет симптомы воспаления в урогенитальном тракте.

Это выделения, болезненность, покраснение, сыпь.

Кроме того, ПЦР проводят:

• после незащищенного полового акта с источником инфекции
• в рамках вторичной профилактики ЗППП, если за последний год человек имел 3 и более половых партнера
• при бесплодии, в процессе поиска причины этого состояния
• перед беременностью или в первом триместре, если она наступила спонтанно
• перед ЭКО или другими вспомогательными репродуктивными технологиями
• при подготовке к операциям на половых органах

Сдача мазка

При первичном осмотре женщины в консультации или платной клинике существуют несколько распространенных методов лабораторного исследования полученного материала. Обычно на приеме или при профосмотре врачи рекомендуют для сдачи три вида мазков на половые инфекции:

1. бактериологический посев,
2. ПЦР анализ на «скрытые инфекции» и
3. микроскопия (т.н. «мазок на флору»).

Кроме этих есть такие методики, как флороценоз, НАСБА, цитоскрининг. В данном материале мы рассмотрим последний метод лабораторной диагностики, т.е. простой «мазок на инфекции», который чаще всего сдают на приеме и осмотре у гинеколога для начальной диагностики.
 

Сдать мазок на инфекции женщины и девушки могут из следующих мест:

Локализация	М	Ж	Д
«C» — шейка матки		+
«V» — влагалище		+	+
«U» — уретра	+	+	+
«R» — анус	+	+	+
«O» — ротоглотка		+	+

Подготовка к сдаче

1-2 суток перед визитом к врачу следует воздержаться от половых контактов;
Перед сдачей мазка на половые инфекции рекомендуется не мочиться в течение 2 часов.
Накануне анализа рекомендуется провести провокацию. Надежным методом считается алиментарная провокация (алкоголь + соленое, острое).
Если есть такая возможность, девушкам желательно сдавать мазок на ИППП перед или после месячных.
 

Как берут мазок на инфекцию

Взятие мазка на инфекции у женщин проводится гинекологом в смотровом кабинете на гинекологическом кресле. Во влагалище врач вводит специальный медицинский инструмент, т.н.»зеркало» и осуществляет взятие материала (выделений) из всех предполагаемых очагов с помощью одноразового шпателя — зондика. Он представляет собой пластмассовую палочку с расширенным концом, которым, делая мазки, гинеколог равномерно распределяет взятый материал по специальному чистому предметному стеклу.

На какие инфекции сдают мазок

Покажет ли мазок инфекцию? Хороший результат женского мазка (т.е. их не обнаружение) нельзя считать абсолютно достоверным, особенно при наличии определенных жалоб. Объясняется это рядом объективных моментов, влияющих на его результат. В ситуациях, когда признаки воспаления налицо, но причина его по результатам обычных мазков на инфекции не ясна, гинекологи могут прибегнуть к дополнительным методам — ПЦР-диагностике, бакпосеву.

Почему результатов мазка на инфекции бывает недостаточно для точной диагностики ЗППП:

Вирусные, хламидийные, микоплазменные и уреаплазменные инфекции практически не определяются в урогенитальном мазке на инфекции. Вирусы, хламидии, уреаплазмы и микоплазмы представляют собой микроорганизмы очень малых размеров, которые сложно заметить под микроскопом при обычном анализе мазка. Для диагностики инфекций в этих случаях существуют другие, более информативные методы (мазок ПЦР, ИФА-диагностика).

Обнаруженный грибок в мазке на инфекции — верный симптом молочницы. Но кандидоз может быть сопутствующим заболеванием, развившемся на фоне более серьезной половой инфекции (ИППП).

Повышенные лейкоциты при микроскопии мазка на инфекции могут быть следствием ошибочной диагностики, при случайном попадании в мазок при взятии гноя. Лейкоцитоз помешает врачу-лаборанту «увидеть» возбудителя.

Во многих случаях влагалищный мазок на инфекции позволяет выявить инфекцию, но не «природу» (возбудителя) этой инфекции и, что не менее важно, с помощью мазка не возможно выяснить чувствительность этих возбудителей к определенным антибиотикам. Эту проблему можно решить проведением бактериологического посева.
 

Цены на услуги

Базовые лабораторные исследования женских выделений, ₽

Методы	Цены
Мазок  женский	450
Мазок мужской	500
Мазок по Граму	1 750
Бакпосев	1 750
ПЦР тесты	450
Флороценоз	3 500
НАСБА	1 300
Взятие анализа	450

Сдача мазка на инфекции

Взятие материала у женщин для анализа мазка на инфекцию гинекологи проводят ежедневно. Используются только одноразовые инструменты и расходные материалы. У девочек и девушек-девственниц зеркало при этой процедуре не применяется! Приглашаем к специалистам нашей клиники в Москве! Также возможная сдача анализов мужчинам (мазок, ПЦР, посев и анализы крови).

Виды анализов на ЗППП

При проведении лабораторных исследований устанавливается точный диагноз и назначается терапия, направленная именно на устранение выявленных возбудителей.

Наиболее эффективными методами считаются:

• анализ крови;
• анализ мочи;
• соскоб из уретры и цервикального канала;
• исследование спермы;
• анализ секрета простаты.

Анализ крови

Анализ крови на ИППП выполняется методом прямой и непрямой иммунной флюоресценции. Материал окрашивают особыми антителами в сочетании с красителями.

Например, достоверность подобного исследования достигает при выявлении:

• сифилиса — 100%;
• микоплазмоза – до 70%;
• хламидиоза – 98%.

Можно выделить следующие исследования:

• анализ крови на TORCH инфекции: токсоплазмоз, краснуха и цитомегаловирус;
• RW – реакция Вассермана (применяется для выявления сифилиса);
• ВИЧ-инфекции, гепатиты B и C.

Анализ мочи

С помощью общего анализа мочи диагностируется воспалительный процесс в мочеполовой системе, а также наличие инфекции.

Для ПЦР мочу сдают в основном мужчины. Единственным и главным недостатком такого метода обследования является то, что можно установить лишь сам факт наличия бактерий, но невозможно определить их количество.

Соскоб из уретры и цервикального канала

Эта диагностика является наиболее эффективной для определения ИППП. Методика совершенно безопасная и безболезненная. Мазок позволяет обнаружить как наличие вредных микроорганизмов, так и их количество.

Забор проводится следующим способом: врач соскабливает материал из уретры и цервикального канала (только у женщин) с помощью специальных инструментов.

Сперма и секрет простаты

Метод диагностики предназначен для обнаружения в биоматериале:

• специфических фрагментов ДНК основных возбудителей инфекций, которые могут передаваться половым путём;
• урогенитальных инфекций мочеполовой системы у мужчин (к ним относятся: гонорея, хламидиоз, трихомониаз, микоплазмоз, уреаплазмоз).

Главным преимуществом диагностики является установление не только наличия возбудителей, но и определение точного их количества.

Семенную жидкость пациент собирает самостоятельно в контейнер. Секрет простаты собирает врач после массажа предстательной железы.

Преимущества и недостатки подхода

У диагностики методом ПЦР много плюсов:

Высокая чувствительность. Метод позволяет выявить возбудителя болезни даже при наличии нескольких молекул его ДНК, то есть на очень ранних стадиях, при хронической форме заболевания, а также в случаях, когда болезнь никак себя не проявляет, протекая латентно.

Универсальность. Для проведения анализа подходит почти любой биоматериал – от крови и слюны до клеток кожи. Широкий охват. Исследование одного образца может выявить сразу несколько возбудителей болезни.

Оперативность. Результат, как правило, готов через 5–7 часов, то есть получить заключение можно уже на следующий день после забора биоматериала.

Точность. Метод ПЦР практически никогда не дает ложноположительных или ложноотрицательных результатов, если была соблюдена технология проведения этого анализа.

Однако следует понимать, что совершенных методов анализа не бывает. У ПЦР есть и минус –  высокие требования к соблюдению технологии и к профессионализму лаборантов. Если образец был загрязнен, анализ может дать ложный результат. Поэтому проводить ПЦР-диагностику желательно только в самых лучших лабораториях, где внедрены системы контроля качества работы.

Когда женщине надо сдавать анализы

Список инфекций, которые способны передаваться при сексуальном контакте, довольно широк.

К ним, в первую очередь, относят венерические заболевания.

Многие из них имеют сходные симптомы.

Поэтому даже при наличии яркой клинической картины, доктор не всегда может определить разновидность патологии.

Кроме того, часто на фоне заражения одной инфекцией начинают проявляться признаки других заболеваний или, наоборот, протекают бессимптомно.

Носительство инфекции является опасным не только для больной женщины, но и для тех, с кем она вступает в половую связь.

Ведь отсутствие симптомов не может гарантировать того, что человек здоров.

В связи с этим, имеется ряд показаний, когда женщине необходимо пройти диагностику на ИППП.

Однозначно, это необходимо сделать, если пациентка обратилась к доктору с жалобами:

1. На наличие дискомфорта в области гениталий, который проявляется жжением или зудом, особенно если эти явления причиняют пациентке сильное беспокойство.
2. При появлении болезненности или неприятных ощущений во время половой близости.
3. Если процесс мочеиспускания сопровождается болезненным состоянием, появляются частые позывы к походу в туалет по-маленькому и при этом выделение урины носит достаточно скудный характер.
4. Появление боли в области матки под лобком или в других отделах гениталий.
5. Если изменился характер вагинальных выделений: увеличилось количество, изменилась структура белей, появился специфический запах, окрашивание или дополнительные включения — кровь или гной.
6. При наличии в моче дополнительных примесей.
7. При появлении в аногенитальной области, зоне промежности или по всему телу различных высыпаний (пузырьки, папулы, кондиломы и др.).

Обследования на ИППП также проводят во время профосмотров, на этапе планирования зачатия, перед оперативным вмешательством, при постановке женщины на учет по беременности и родам.

Для сдачи женских анализов на инфекции обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Расшифровка полученных результатов

Метод исследования ИФА строится на выявлении антигенов к разным вирусам. Новый микроорганизм, поселяющийся в человеке, получает от него ответ его иммунной системы. У каждого вида вируса свой антиген. Присутствие антигена LGG к вирусу говорит о том, что иммунитет к нему уже выработан, так как человек болел этой вирусной инфекцией раньше. Если есть антиген LGM, то вирус первый раз внедрился в организм, и идет процесс выработки иммунитета к этому вирусу. В острой фазе инфекции в крови присутствуют оба антигена.

Расшифровать результат исследования методом ПЦР может и не врач, если есть ДНК вируса, то есть и вирус. В некоторых случаях бывают и ошибки. Сам метод очень точный, ошибки могут быть возникнуть по вине медработников, которые делали забор крови.

Какие инфекции можно выявить в ПЦР мазке

Для диагностики большинства инфекций берут мазок или соскоб из различных участков тела.

Их берут оттуда, где имеется воспалительный процесс.

Либо данные анамнеза указывают, что инфекция могла попасть в соответствующую область тела.

Например, при наличии в анамнезе анального полового контакта доктор возьмет мазок из ануса.

Если же таких данных нет, ограничится уретральными и вагинальными мазками.

В большинстве случаев инфекции, которые передаются половым путем, первично поражают уретру.

Хотя возможны и другие локализации.

Например, у женщин трихомонада и кандида чаще вызывают воспаление во влагалище.

Хламидия первично поражает шейку матки.

У мужчин кандида или гарднерелла могут инфицировать головку пениса, но при этом не колонизировать уретру.

Герпетическая и папилломавирусная инфекциям может вызвать воспаление где угодно: не только на гениталиях, но и возле них – в паху, на лобке и т.д.

Поэтому в каждом случае врач в индивидуальном порядке решает, откуда взять мазки.

Он учитывает:

• данные анамнеза – чем болен партнер, от которого могло произойти заражения, какие виды секса практиковала пара;
• жалобы – где у пациента болит, зудит, откуда появились выделения;
• данные объективного исследования – доктор смотрит, где располагается сыпь, участки покраснения или отечности.

Например, если при осмотре горла венеролог заметит покраснение, то он может взять мазок для исследования ПЦР на инфекции.

В том числе в случаях, когда пациенты отрицают оральные половые контакты.

Мазок ПЦР изо рта инфекции

Многие возбудители способны поражать ротовую полость, глотку, миндалины.

Это может быть:

• гонококк
• хламидия
• бледная спирохета (сифилис)
• герпес

Для их выявления берут мазок изо рта.

Клинический материал получают из того места, где обнаруживаются признаки воспаления.

Исследование таких мазков при помощи ПЦР имеет небольшое диагностическое значение, если имеет место поражение урогенитального тракта.

Потому что в любом случае болезнь лечат системными антибиотиками, поэтому бактерии погибают везде.

Но около 5% форм инфекций протекает в изолированной орофарингеальной форме.

То есть, бактерии во рту есть, а в урогенитальном тракте их нет.

Это почти все случаи первичного сифилиса, если заражение произошло при оральном сексе.

Нередко встречаются изолированные гонококковые или хламидийные фарингиты, тонзиллиты, стоматиты.

Их появление чаще всего обусловлено использованием презерватива во время вагинального секса.

Но при оральном контакте контрацепция не используется, поэтому происходит передача инфекции.

ПЦР-диагностика: расшифровка

Анализ совмещает в себе достоинства качественного и количественного теста.

Качественные характеристики отражают в бланке отметками “не обнаружено”.

То есть ответ отрицательный

Или “обнаружено” при положительной пробе.

• Отрицательному ответу соответствует ситуация, когда нет даже намеков на удвоение нуклеиновых цепочек даже при стимуляции ферментами-ускорителями. Это происходит, когда РНК или ДНК, характерные для искомого возбудителя, отсутствуют либо их количество находится за порогом чувствительности теста.
• Положительные результаты приходят, если имеется разгар клинических проявлений инфекционного процесса или носительство инфекционного агента. После лечения половой инфекции положительный результат регистрируется на протяжении первых девяти месяцев в среднем (могут быть сокращения сроков до трех или удлинение до двенадцати месяцев).

Ложноотрицательный и ложноположительный анализ тоже возможны.

Сразу после лечения и в течение шести-девяти месяцев после его окончания диагностика может свидетельствовать о присутствии генетической информации возбудителя в крови или других средах и тканях организма.

По истечении указанного срока анализ становится отрицательным.

ПЦР на Streptococcus agalactiae и species

Мазок методом ПЦР из влагалища берут на Streptococcus agalactiae.

Это делают в основном у беременных, на 35 неделе.

Цель исследования – предотвращение неонатальной инфекции.

Если инфекция будет выявлена, женщина получит лечение.

Это позволит избежать инфицирования плода во время родов.

Streptococcus agalactiae является возбудителем неонатального сепсиса и менингита.

По данным разных авторов, частота стрептококковых инфекций у новорожденных составляет 1-5%.

В случае их развития тяжелых осложнений летальность превышает 20%.

Мазки методом ПЦР на Streptococcus species берут с целью выявления различных видов стрептококков, а не только agalactiae.

В ходе тестирования определяется участок ДНК, общий для разных видов бактерий рода Streptococcus.

Если в результате исследования будет получен положительный результат, точный вид микроорганизма останется неизвестным.

Но антибиотикочувствительность у разных видов стрептококков приблизительно одинаковая, поэтому точная этиологическая диагностика не особенно важна для выбора терапевтической тактики.

Преимущества и недостатки

За широкий перечень преимуществ автор методики получил Нобелевскую премию, как подтверждение признания специалистов универсальности и высоких возможностей такого способа диагностики.

К неоспоримым достоинствам ПЦР можно отнести следующие:

• Очень высокая чувствительность. Обычно говорят о чувствительности от 95 до 100%, но это усредненные данные. Этот показатель отличается для разных микроорганизмов. Так, для гепатита С он не бывает ниже 97% (при условии выполнения всех требований), а для определения уреаплазмоза — не менее 99%. Такая чувствительность является самой высокой на данный момент, поэтому способ почти не имеет конкурентов по этой характеристике.
• Возможность применения на самых ранних стадиях. В то время, когда другие методы диагностики еще не способны выявить возбудителя из-за его малого количества в образце пробы, ПЦР уже выдает корректный результат. Обнаружить присутствие возбудителя можно даже при наличии единственного экземпляра, а в некоторых случаях — только фрагмента микроба. По этой причине способ применяется и при хронических или скрытых течениях патологий, а также в стадии инкубации.
• Широкий спектр результатов. Анализ способен выявить одновременно несколько возбудителей, для этого не понадобится проводить повторные манипуляции. Иногда удается найти возбудителей, которые даже не предполагались при первичной диагностике.
• Универсальность образцов. В качестве пробы могут быть представлены образцы крови, слюны, мокроты, волосы, выделения из влагалища, клетки разных тканей.
• Скорость получения результатов. В большинстве случаев ответ получают через 5-6 часов. Для культурального анализа, приближающегося к полимеразной цепной реакции в плане точности, такой же результат можно получить в срок от нескольких дней до пары недель.
• Количественное определение возбудителя. Этот параметр позволяет определять титр микробов в материале, а это свойство часто необходимо для оценки эффективности выбранной тактики лечения.
• Выявление самого микроорганизма, а не определение его реакций. Большинство анализов основаны на ответной реакции возбудителя на химические реактивы, окрашивание и т. д. Этот способ диагностики позволяет обнаруживать непосредственно микроб, а не косвенные признаки, антитела и т. п.

Несмотря на такой широкий перечень преимуществ, у метода есть и некоторые недостатки:

• Из-за загрязнения пробы предыдущим образцом может произойти ложное выявление микроорганизмов. Такое происходит при загрязнении инструментов или реактивов, участвующих в ходе анализа. Даже в воздухе присутствуют фрагменты микробов, способных отразится на результате, поэтому в таких лабораториях обязательно должен быть установлен биологический фильтр с максимальной степенью очистки воздуха.
• Ложноотрицательный результат. Даже при всех явных проявлениях болезни иногда получают отрицательные данные. Причина этого – в неверно выбранном месте для взятия образца, поэтому персонал лаборатории должен обладать достаточной квалификацией, знаниями и опытом.
• Оценка данных должна производиться исключительно лечащим врачом, потому что интерпретация результатов ПЦР-анализа — сложный процесс. Наличие положительного ответа не всегда означает болезнь. Дело в том, что после того, как заболевание успешно пролечено, фрагменты возбудителя долго присутствуют в крови, поэтому заключение может сделать только очень квалифицированный специалист.
• Высокая стоимость диагностики с применением полимеразной цепной реакции. Цена обусловлена дорогостоящим оборудованием и высокими требованиями к условиям лабораторий и квалификации персонала.

Обязательные условия для получения точных данных в ПЦР-лабораториях:

• корректный механизм забора проб и их правильная транспортировка в лабораторию;
• точное соблюдение методик в ходе выполнения анализа;
• высокая стерильность и максимальная автоматизация процесса;
• использование одноразовых инструментов;
• система внутрилабораторного контроля для подтверждения достоверности данных.

При условии выдерживания всех требований на основе данных, полученных при помощи методики ПЦР, можно не только определить болезнь, но сделать прогноз ее течения и составить алгоритм лечения.